有幾種高速離心機(jī)分離技術(shù)方法:
A.差速離心:逐次增加離心力,每次都可以沉降樣品溶液中的某些成分。
差速離心是一種常用的方法。在這種方法中,離心管一開(kāi)始就裝滿了均勻的樣品溶液。離心一定速度后,可以獲得兩個(gè)部分:沉淀和上清液。
通常,當(dāng)你離心時(shí),你會(huì)沉降大多數(shù)不必要的大顆粒。此時(shí),所需的大部分成分仍然留在上清液中。然后以更高的速度將收集到的上清液離心,沉積所需的顆粒。離心時(shí)間要選擇得當(dāng),這樣大部分不必要的小顆粒才能留在上清液中。對(duì)于沉淀和上清液,可以進(jìn)一步離心,直到達(dá)到所需的分離純度。差速離心的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單,但分離純度不高。
B.密度梯度離心法:可以同時(shí)將樣品中的幾個(gè)或全部成分分開(kāi),具有良好的分辨率。
1)速度區(qū)帶法:
根據(jù)樣品中不同顆粒的大小和沉降速度,(S)。一般方法如下:
密度梯度溶液安裝在離心管中,溶液的密度逐漸從離心管頂部底部增加(正梯度)。查特液氮罐
小心翼翼地將需要分離的樣品加密到梯度溶液的頂部。高速離心機(jī)是常規(guī)實(shí)驗(yàn)室使用的離心機(jī),廣泛應(yīng)用于生物、化學(xué)、藥業(yè)等科研、教育和生產(chǎn)部門(mén)。它利用轉(zhuǎn)子高速運(yùn)行產(chǎn)生的強(qiáng)大離心力,將液體與固體顆?;蛞后w混合物中的所有成分分離出來(lái),適用于快速分離生成的少量樣品。樣品在梯度溶液表面形成負(fù)梯度。
由于在離心力的影響下,不同尺寸的顆粒以不同的梯度移動(dòng),離心后會(huì)形成幾個(gè)單獨(dú)的樣品區(qū)帶。冷凍離心機(jī)是通過(guò)離心力加速需要分離的不同材料分離的機(jī)器。冷凍離心機(jī)分為低速、高速冷凍離心機(jī)、超速分析、雙用冷凍離心機(jī)制備等多種型號(hào)。
注:樣品粒子的密度大于梯度液注中的任何一點(diǎn)密度。在區(qū)帶到達(dá)管道底部之前,離心過(guò)程停止。
等密度(單位:g離心法:/cm3或kg/m3:
按照粒子的不同密度進(jìn)行分離。在離心過(guò)程中,粒子會(huì)移動(dòng)到與自身密度相同的地方形成區(qū)帶。金鳳液氮罐
密度樣品的選擇應(yīng)包括所有需要分離的顆粒的密度。樣品可以均勻地分布在密度梯度的液體顆粒上方或密度梯度上。離心后,樣品顆粒達(dá)到它們的平衡點(diǎn)。
注:粒子平衡后的分離取決于其密度,與時(shí)間無(wú)關(guān),此時(shí)再改變離心轉(zhuǎn)速,只能改變區(qū)帶的位置關(guān)系。金鳳液氮罐