如果您想從干細(xì)胞液氮罐內(nèi)輸出液氮時,請按下列程序操作 干細(xì)胞液氮罐的使用步驟 查特杜瓦瓶 1.配置冷存液,取10%的DMSO+90%的胎牛血清,4℃冰箱保存預(yù)冷。 2.用胰酶對細(xì)胞進行消化:
如果您想從干細(xì)胞液氮罐內(nèi)輸出液氮時,請按下列程序操作
干細(xì)胞液氮罐的使用步驟
查特杜瓦瓶
1.配置冷存液,取10%的DMSO+90%的胎牛血清,4℃冰箱保存預(yù)冷。
2.用胰酶對細(xì)胞進行消化:倒去培育瓶中的培育基或用槍留意吸去培育板中的培育基,PBS清洗兩次,用胰酶消化細(xì)胞(盡量柔順)。
3.再次用完全培育液懸浮細(xì)胞,將預(yù)冷的凍存液加入消化完全的細(xì)胞中,用滴管悄悄吹打混勻。
4.在每支凍存管中加入1ml細(xì)胞液,密封后標(biāo)記凍存細(xì)胞稱號和凍存日期。
5.凍存步調(diào)的精細(xì)直接關(guān)系到細(xì)胞復(fù)蘇時的生機,假如有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐)對照好;或許不妨在4℃的溫度條件下儲存2h;再總結(jié)一句,通常細(xì)胞在-80℃儲存半年控制,在液氮里不妨安放更長久光。
一、干細(xì)胞液氮罐使用前的檢查:
液氮罐在充填液氮之前,首先要檢查外殼有無凹陷,真空排氣口是否完好。若被碰壞,真空度則會降低,嚴(yán)重時進氣不能保溫,這樣罐上部會結(jié)霜,液氮損耗大,失去繼續(xù)使用的價值。其次,檢查罐的內(nèi)部,若有異物,必須取出,以防內(nèi)膽被腐蝕。
二、液氮的充填:
填充液氮時要小心謹(jǐn)慎。對于新罐或處于干燥狀態(tài)的罐一定要緩慢填充并進行預(yù)冷,以防降溫太快損壞內(nèi)膽,減少使用年限。充填液氮時不要將液氮倒在真空排氣口上,以免造成真空度下降。蓋塞是用絕熱材料制造的,既能防止液氮蒸發(fā),也能起到固定提筒的作用,所以開關(guān)時要盡量減少磨損,以延長使用壽命。
三、干細(xì)胞液氮罐中液氮的貯存:
液氮罐貯存液體介質(zhì)時,請務(wù)必要關(guān)閉進/排液閥和增壓閥,必須打開放空閥。
四、干細(xì)胞液氮罐中液氮的運輸:
液氮罐運輸液氮介質(zhì)時,務(wù)必保證各閥門的開關(guān)狀態(tài)應(yīng)和貯存時的一樣,并請將包裝箱底座墊在容器座圈子下,用繩索將液氮罐容器可靠地固定在汽車上,使液氮罐在運輸?shù)倪^程中不會搖動。
五、干細(xì)胞液氮罐中液氮的輸液:
如果您想從液氮罐內(nèi)輸出液氮時,請按下列程序操作:
查特杜瓦瓶
關(guān)放空閥;開增壓閥;觀察壓力表;當(dāng)壓力上升到0.05MPa(0.5kg/cm2)時,打開排液閥,即可以連續(xù)輸液。
六、使用過程中的檢查:
使用過程中要經(jīng)常檢查??梢杂醚塾^測也可以用手觸摸外殼,若發(fā)現(xiàn)外表掛霜,應(yīng)停止使用;特別是頸管內(nèi)壁附霜結(jié)冰時不宜用小刀去刮,以防頸管內(nèi)壁受到破壞,造成真空不良,而是應(yīng)將液氮取出,讓其自然融化。